在实验过程中往往会有不尽人意的地方,比如说ELISA实验背景过高,那么 造成ELISA实验背景过高的主要原因有哪些呢?
1、不正确的洗涤
洗涤不充分或省略洗涤步骤中的任何一步均会导致背景色过高。
解决方法:检查洗涤缓冲液的体积并确保完成所有的洗涤步骤;确保洗涤缓冲液的正确稀释和正确使用。
2、底物污染
确保在使用前,底物不被金属离子或氧化剂污染;在实验时留存一些额外的底物,底物本身不应该有颜色。
3、底物曝光
底物曝光会使底物变成蓝色,因此在加入板内之前要保存在暗处(即试剂瓶内)。
4、HRP的错误稀释
HRP浓度过高会造成高背景色,因此要严格按照产品说明书稀释。
5、错误的孵育时间和温度
必须严格按照产品说明书来定孵育时间和温度。
6、包被板保存不当
如果包被板只用了一部分,一定要正确保存剩余的板条。
注意好以上几点相信你的实验会非常顺利了。如有疑问欢迎给我司来电咨询。
ELISA实验背景色过高的主要原因及解决方法
作者:北京雅安达生物技术有限公司 2015-07-31T00:00 (访问量:4148)
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