与香豆素和花菁相比,罗丹明通常更耐光并且对PH值不敏感。被广泛使用的罗丹明胺包括罗丹明110、四甲基罗丹明(例如TAMRA或TRITC)和X-罗丹明(例如TexasRed)。罗丹明缀合物必须仔细制备,因为当多于两个或三个染料分子共价附于靶分子(例如抗体分子)时,它们特别容易淬灭。
常见罗丹明染料光谱性质
表一 四甲基罗丹明(TRITC)光谱性质
图1.四甲基罗丹明(TEITC)的激发和发射光谱
罗丹明反应性染料
反应性荧光罗丹明和罗丹明衍生物广泛用于共价标记生物分子,例如抗体、碳水化合物、核酸、蛋白质、肽和寡核苷酸。罗丹明共轭物可产生明亮且稳定的橙色荧光,常与蓝色、绿色或远红外色荧光探针组合使用,用作检测酶活性或在多重荧光研究中提供对比的底物。特定的罗丹明和罗丹明衍生物很容易与染料的各种基团进行反应。
表二 可用于标记生物分子的反应性罗丹明和罗丹明衍生物
表三 罗丹明标记的荧光缀合物
表四 其他罗丹明指示剂