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大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)

大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)

商家询价

产品名称: 大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)

英文名称: Enterokinase, Recombinant, Expressed in E.coli

产品编号: 20401ES60

产品价格: 408.00

产品产地: 翌圣生物

品牌商标: Yeasen

更新时间: 2024-12-10T11:21:51

使用范围: null

规格 价格
100U 408.0
200U 618.0
500U 1188.0
1000U 2145.0
5000U 6745.0
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产品描述

重组肠激酶(rEK)是高纯度的牛肠激酶轻链亚基,它有着和天然提取的肠激酶同样特异的切割酶活性,切割位点Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签,本rEK具有比天然酶更高的切割活性。

本品为采用重组大肠杆菌分泌表达的高纯度、高活性、高特异的牛肠激酶,适用范围广,并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。本品不含标签,由于具有极高酶切活性,酶切反应使用量少,不影响下游蛋白应用,故后续不需将其去除。

 

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

20401ES60

20401ES70

20401ES76

20401ES80

20401ES90

20401

rEK重组肠激酶

100 U

200 U

500 U

1000 U

5000 U

 

运输和保存方法

冰袋运输。试剂盒内各组分-20°C保存两年,尽量避免反复冻融(5次以内没问题)

 

基本特性

来源(Source)

E.Coli

分子量(Molecular Weight)

理论值25.850 kDa

外观(Appearance) 无菌液体

酶浓度(Enzyme Concentration)

≥5 U/uL

活性定义(Activity Definition)

一个活性单位定义为25°C,12-16 h,在25 mM Tris-HCl,Ph 8.0缓冲体系下,将500 μg带有肠激酶酶切位点的融合蛋白切开95%所需要的酶量

内毒素检测(Endotoxin) 用LAL法测定内毒素含量小于1 EU/μg

质量保证(Quality assurance

经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;本制品中不含有非特异性的蛋白酶切活性

常见影响肠激酶活性的因素(Influence factors >2 M尿素,>200 mM NaCl,>20 mM β-ME,>0.1%SDS,>50 mM咪唑,或>5%甘油

 

应用举例

】该酶效力高且待切蛋白结构性质不同,建议先进行预实验摸索酶使用浓度及酶切反应时间。

1)反应体系

融合蛋白

0.05-0.1 mg(蛋白浓度:0.1-1 mg/mL)

Enterokinase

0.1-0.2 U

缓冲体系

25 mM Tris-HCL 8.0

注:缓冲液的使用体积等比例融合蛋白和酶使用量的总和。

2)反应条件:25°C过夜酶切(注:完全酶切需要16-24 h)。

【注】重组肠激酶可使用25 mM Tris-HCl pH 8.0稀释成每1 μL含0.1单位的溶液使用。

反应条件:4°C低温酶切条件,完全酶切需要48-64 h 或者增加2-3倍酶量。

 

注意事项

1)本产品所讲述的缓冲体系需要自行配置。
2)在>200mM咪唑,或>200mM NaCl,或>5%甘油,酶切会受到影响。如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种,为获得理想的酶切结果,请先将样品透析到25 mM Tris-HCl 8.0缓冲液中,然后再进行酶切实验;若不方便透析,可将样品稀释,使得各组分低于干扰浓度后再酶切,酶的用量与蛋白比例不变;若干扰因素很多,且不便去除,需要适当增加酶量或延长酶切时间,有助于得到理想的酶切效果。
3)磷酸盐对Enterokinase有很强的抑制作用,痕量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性,因此在酶切体系内不能存在磷酸盐。
4)本品是具有高酶活力重组肠激酶,切割蛋白使用量少,可不考虑除去。
5)蛋白酶切效果不好,可适当增加酶量,或适当延长酶切时间。
6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

HB220829